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【在線交流】專注于藻類研究28年的范老師邀您一起學習小球藻的培養及應用

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    本帖最后由 一片云 于 2017-8-17 11:48 編輯

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    小球藻的培養及應用

                                                              —— 范秀娟

    時間:102720:00

    地點:中國水產頻道公開課  中國水產頻道  【在線交流】欄目同步直播

    水產前沿網

      小球藻是一種單細胞綠藻,屬于綠藻門、綠藻綱、綠球藻目、小球藻科、小球藻屬,小球藻細胞形狀為球形或橢圓形,是一種可以被大規模培養的微藻。大家也許都知道小球藻可以作為蝦苗、蟹苗的天然餌料,能夠提高水體溶氧量,能夠調節水質:降低水中氨氮、硝酸鹽、亞硝酸鹽含量,改善水體的pH,提高水生動物的抗病能力,調節藻相控制有害藻類等。但是目前還有很多的養殖戶對藻類的概念并不是非常清楚,加之市場上說法太多,難以分辨。為此黑龍江生物科技職業學院從事藻類研究28年的范秀娟老師在百忙之中抽出時間給大家普及藻類的一些知識,她將從藻類最基本的概念開始講解,讓大家首先對藻類有一定的認識,然后重點介紹小球藻的培養和應用,最后再講講小球藻在實踐中的具體使用。

      我們將第一堂課的時間定在10月27日晚20:00,主題為《小球藻的培養及應用技術》。
      
      小伙伴們,約起吧!

    嘉賓介紹
      
    范秀娟
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      范秀娟,博士,黑龍江生物科技職業學院教師,從事水生生物的教學和研究工作28年,主要從事的藻類分類和培養研究,近些年研究小球藻、螺旋藻等培養及應用,現在分別在全國各地進行試驗,并逐步推廣。獲得一種高效輪蟲培養箱和一種浮游藻類的采集裝置的專利。曾擔任《水產動物藥物學》主編,《水生生物學》副主編。
      
    課程提綱:
      
      1、藻類的基本概念  
     、僭孱惙诸悾11大類)  
     、谠孱惖暮暧^特征  
     、墼孱惖溺R下結構  
     、芗毎螒B與體制
      
      2、小球藻生物學特性
      
      3、小球藻的培養
      
     、傩∏蛟迮囵B的物理條件  
     、趩伟宓纳L模式  
     、蹎伟宓呐囵B方式 
     、茉孱悹I養配方  
      ⑤培養方法  
     、藿臃N  
      ⑦培養管理
      
      4、小球藻的應用

    課程錄音:



      
    怎樣上課
      
      10月27日(星期四)晚20:00開始
      
      中國水產頻道公開課 | 語音直播 + PPT圖片
      
      在水產前沿微信公眾號中回復“015”根據提示獲取本次微課在線教室地址
      
      (不是微信群直播哦)
      
      注:課程是直播,不想錯過互動,請按時上課哦
      
      課程結束后,回放立即生成,可重復聽
      
    如何報名
      
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      本課程的全部內容  
      包括:文字、聲音、圖片等  
      學員只能在中國水產頻道授權下才能使用這些內容 
      不得擅自復制、篡改這些內容 
      或創造與內容有關的衍生品  
      同學,等你噢!

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    本帖最后由 一片云 于 2016-11-2 16:36 編輯

    本文長度為5000字,建議閱讀10分鐘以上
    這是一位從從事藻類研究28年理論與實踐的在校老師,聽他說說藻類小球藻的那些事:
    1、首先,從宏觀上講藻類的基本概述,讓大家對藻類有一個大致的認識;
    2、然后,詳細介紹小球藻的生物學特性,為小球藻的培養和應用奠定理論基礎
    3、最后深入講解小球藻的培養與應用。


    范秀娟:
    各位朋友大家好!歡迎大家來到我的課堂!我們一起學習和交流。
    今天我給大家交流的話題是小球藻的培養及應用。
    我將從四個方面進行講解:藻類的概述、小球藻生物學、小球藻的培養、小球藻的應用。


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    發表于 2016-10-28 16:00:59 |顯示全部樓層
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    dyc7860 發表于 2016-10-28 13:38
    想聽聽錄音

    錄音要稍微晚幾天了
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    發表于 2016-10-30 16:41:34 |顯示全部樓層
    在路上... 發表于 2016-10-29 14:24
    到時 錄音在哪可以聽到

    就在這里就可以聽到
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    發表于 2016-11-2 16:42:19 |顯示全部樓層
    首先講講藻類的概述

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    藻類通常分為11大類

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    每種藻類都有具體的很多種類,通常有些種類對水產養殖來說是有益藻類,而有些種類對水產養殖來說是有害種類,但是有益有害不是絕對的,而是相對的。


    每種藻類都有具體的很多種類,通常有些種類對水產養殖來說是有益藻類,而有些種類對水產養殖來說是有害種類,但是有益有害不是絕對的,而是相對的。


    比如說綠藻類里面的小球藻、柵列藻、卵囊藻都是目前我們大量培養的藻類,而水綿、剛毛藻也是綠藻類里面的,但它屬于青苔類,對養殖來說是有害藻類。


    又比如說藍藻類,大家一談到藍藻類的藻類都很害怕,怕它大量發生產生危害,但藍藻類中的藻類也不全是有害的種類,而有些藻類是有益藻類,比如說螺旋藻。


    所以說我們不能根據某一大類就斷定這些藻類是有利和有害,而是要根據具體的種類和數量來判斷,這種工作就需要在顯微鏡下面鏡檢,那么首先我來介紹一下藻類的基本概念。



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    發表于 2016-11-2 16:50:39 |顯示全部樓層
    2、藻類的基本概念


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    藻類屬于一種小型的、微觀的在顯微鏡下能夠觀察的藻類,屬于微藻類,主要有8大類的藻類,即綠藻類、硅藻類、藍藻類、裸藻類、甲藻類、黃藻類和隱藻類。


    藻類是沒有胚胎,有葉綠素自養無根莖葉分化的葉狀體孢子植物。


    我們如何觀察這些藻類呢?


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    發表于 2016-11-2 17:00:09 |顯示全部樓層
    首先可以從宏觀上:



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    ①第一是
    看水色。
    通常一個顏色的水,并不是一種藻類,綠顏色的水它有綠藻,還有裸藻;黃顏色的水有金藻、甲藻、黃藻、硅藻;紅顏色的水有血紅裸藻、甲藻、殼蟲藻、席藻;藍顏色的水有微囊藻、魚腥藻。我們單純從水色來判斷這個水相好不好是不科學的。

    ②第二個判斷的標準看水華現象。
    水華有溶液狀(硅藻、綠球藻等非鞭毛藻)、
    云霧狀(隱藻、扁藻等鞭毛藻)、
    膜狀(微囊藻、魚腥藻等帶偽空泡)、
    塊狀(實球藻、團藻),
    這些不同現象的藻類也含有不同的藻類,所以根據水華現象我們也不能準確的判斷藻類到底是哪一種。

    ③第三個判斷的標準用手觸摸,每種觸摸的感覺不一樣,它所含的藻類的品種也不一樣。比如不粘手不發粘的有可能是微囊藻和實球藻,沾手不易清洗的可能是魚腥藻和綠裸藻,光滑的可能是水綿,粗糙和發澀的可能是剛毛藻。

    ④第四個判斷標準用鼻子聞,聞水的味道,有刺鼻嗆味可能是微囊藻或者其它種藻類。

    以上我說的都是可以用眼睛看,用手可以摸的等的宏觀的一些標準,但是不能僅從宏觀上判斷某種藻類,而是要根據它的微觀鏡檢的結構來進行準確的判斷。

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    4、藻類的鏡下結構

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    藻類有細胞壁、細胞質和細胞核。


    細胞壁通常有2種情況,一種是沒有細胞壁,另一種是有細胞壁。

    細胞質內有色素、色素體、同化產物和鞭毛。


    色素成分的不同有葉綠素使得藻類呈綠色、黃色素使得藻類成黃色、藻膽素使得藻類成藍色或紅色。
    我們通常能夠看到不同顏色的水,就是由于它色素的不同,使得水的顏色的不同。
    所以從宏觀上看水色的不同只能是初步判斷大致是哪幾種藻類,但是不能準確判斷它具體是哪種藻類,而要在顯微鏡下看,通過檢查細胞的結構、從細胞壁、細胞質里面的特征來觀察鑒別它是哪種藻類。

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    藻類由于它個體比較小,我們通常鏡檢的時候,我們要用目鏡是10×和16×的兩種,物鏡是有4×、10×、40×、100×,我們看藻類的時候通常要用用到目鏡10×或者16×,物鏡10×或者40×,也就是放大倍數最大640倍就可以了,而不用油鏡的100×鏡頭。




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    藻類的形態有多種多樣的形態,每種藻類的形態不一樣,它的結構也是不一樣的,要從它的細胞質和細胞核以及細胞內的結構來判斷。

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    藻類有單細胞、單細胞群體和多細胞的藻類。在顯微鏡下藻類形態多種多樣,要對照圖譜鑒別每種藻類,而不能僅從宏觀上判斷是哪種藻類。


    這就是我講的藻類的基本概述,給大家講一個概念性的東西。詳細知道有很多問題,以后我們可以再進一步交流。

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    二、小球藻的生物學特征

    下面涉及到我們的話題,小球藻的培養和應用的問題。
    首先介紹小球藻的生物學

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    小球藻是一種單細胞綠藻,屬于綠藻門、綠藻綱、綠球藻目、小球藻科、小球藻屬,常培養的有:蛋白核小球藻、橢圓小球藻、普通小球藻三種。


    市面上大家經常見到的小球藻多數是蛋白核小球藻和橢圓小球藻。蛋白核小球藻因為蛋白含量比較高,一般可以作為飼料,同時也可以作為一種調水劑。

    蛋白小球藻在高溫季節不是很穩定,橢圓小球藻相比蛋白小球藻在高溫季節要穩定一些。

    小球藻在自然水體里面有很多,它可以生活在淡水或半咸水和海水里面。淡水的種類通常是在肥沃的自然水體和潮濕的土壤中,現在大規模的培養已經成功。

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    小球藻是單細胞藻類,小型(2-12um)

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    發表于 2016-11-2 17:36:08 |顯示全部樓層
    這張圖是蛋白核小球藻的圖片。

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    蛋白核小球藻在瓶子里面裝,是均勻的、綠色的液體狀(這里的第一幅圖),把它放到池塘外進行擴培,首先我們要看池塘里面的條件,如果池塘里面有大量的原生動物、輪蟲、枝角類首先要對池塘進行處理,不然小球藻下到池塘里面就會被這些大型的動物吃掉。


    現在市面上有很多小球藻在出售,小球藻到池塘外到底能不能擴培成功這是一個很關鍵性的問題。
    首先就是產品本身小球藻的種類和數量要足夠,活性足夠強。第二池塘外的條件還必須要有它的適當的肥料,就像我們種莊稼似的,種子撒上了,如果沒有肥料也不可能長得很好,長起來,小球藻也是同樣的。


    一個小球藻在20個小時內能繁殖成4個,它是以4的n次方的速度往上生長,但是它同時需要有培養基。


    另外小球藻在擴培的時候它分海水種和淡水種,在鹽度不同的情況下使用的小球藻也不是完全一樣的。
    淡水中的小球藻放到海水里面,由于它滲透壓的不一致,它繁殖的也不可能好,有的小球藻放到水里面沒繁殖起來就是這個道理。


    我有一個朋友拿到淡水藻的小球藻放到海水里面結果他來問我說小球藻怎么繁殖不起來呢?是因為他的淡水藻的小球藻放到海水里面由于海水里面的滲透壓和淡水里面的滲透壓不同所以它沒能夠繁殖起來。(剛才我講的是三幅圖里面的第二幅圖。)


    第三幅圖是室內養殖東星斑的一個代表,它是利用小球藻的水進行養殖的。

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    發表于 2016-11-3 14:18:48 |顯示全部樓層
    下面我給大家的三幅圖是市面上一些廠家生產的小球藻產品。

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    到底哪個品種好與不好,產品質量如何?我們不能單從顏色上看,而要拿到顯微鏡下鏡檢,才能夠知道它到底是不是小球藻和它的活性如何。


    小球藻在鏡檢下通常它是圓的(蛋白核小球藻),它的顏色色素體我們能夠看到,如果它的品質好,那么它的色素沉淀得也會很好,如果色素沉淀得不好,說明它的活性就不夠好。


    我在實驗室曾經買了10幾個廠家的產品,有些廠家的產品在實驗室里面根本就繁殖不起來,它看著是綠色的,但是它到我們進行培養的時候培養不出綠色的小球藻,說明它的顏色雖然對了,但它不是小球藻,它可能是其它成分兌出來的。


    另外還有一些種類他是有小球藻,但他的種類和數量特別的少,它可能也繁殖不好。小球藻的繁殖是要有一定的條件的。

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    下面來跟大家說一下小球藻的繁殖到底需要什么樣的條件。


    小球藻的培養
    通常我們做過實驗:
    蛋白核小球藻、橢圓小球藻都是無性繁殖,就是我剛才說的細胞分裂1個變4個,再以4的n次方的速度在20個小時內往上發展 ,繁殖速度非?欤
    比較合適的溫度是20-36度,隨著溫度的升高,繁殖的速度逐漸加快;
    pH5.5-8.0,鹽度可以從淡水做到海水,我們實驗室做到40‰-50‰之間都做到過;
    光照條件:5000-8000lux。

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    這個怎么判斷呢?我給了一幅圖,圖上用32w的燈泡進行判斷,它的培養距離是30cm、20cm、10cm,當它距離10cm就是5000lux。

    設定的培養條件對養殖來說非常非常重要,我們根據不同地區,從南到北,由于當地的水質條件、環境條件、溫度的不一樣,培養的結果都不同。

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    發表于 2016-11-3 14:29:28 |顯示全部樓層
    小球藻的生長模式

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    小球藻的生長模式分為幾個階段,最開始的時候是延緩期,生長速度比較慢,然后進入指數生長期,再進行相對生長下降期,最后靜止期和死亡期。


    也就是說小球藻剛開始生長是比較緩慢的,它通常在第一天到第二天的時候長速很慢,而它在第3天到第4天的時候進入了對數生長期,生長速度就很快,長到一定高峰時期,相對生長速度逐漸下降下來,然后就進入了死亡期,也就是說我們在培養藻類的時候如果控制不好進入死亡就會產生倒藻。


    池塘中有時候藻類生長到最旺盛的時候最容易大量的死亡,就是出現了倒藻現象,它就進入了最后的時期死亡期。

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    發表于 2016-11-3 15:38:44 |顯示全部樓層
    小球藻的培養

    小球藻的培養有三級培養。


    ①一級培養是實驗室培養,叫做藻種分離和藻種保存,通常一級培養是在實驗室做的。
    二級培養和三級培養才是我們大家在室外能夠進行培養的。
    ②二級培養,室外培養,需要針對實驗室給出的藻種,摸索好當地的培養條件(水質、光照和營養條件)再進行二級擴培。我給出的兩幅圖片,第一幅圖片是實驗室做的,第二幅圖片是室外進行二級培養做的,在培養的時候也要進行消毒、接種、設置培養條件、培養管理,我們在以后大規模培養的時候給大家講細一點,它是一致的。

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    ③第三級培養是工廠化的培養,大規模培養,我給了三幅圖,這三幅圖分別是跑道池的培養、管道的培養和圓柱形的培養,這三個都是大企業采用的培養方法。

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    養殖戶如果想做的話,我們沒有那么大型的設備,我們可以采用簡易的設備或者池塘進行擴培,可以用塑料袋(苗種的那種塑料袋)也可以,也可以用買那種大的塑料桶進行擴培,但是在外面擴培的時候一定要注意消毒干凈,不能有其它微生物的進入。


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    藻類營養需求

    我們在進行培養的時候有了藻種,我們還需要營養,就像我們人每天要吃飯一樣,藻的培養需要營養。

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    ①它的營養成分一定要有碳源,也就是說我們在培養的時候要通入空氣,空氣里面含有二氧化碳,通常含有1-5%的二氧化碳。在一個培養基里面要有碳酸鹽,通常可以用小蘇打成分。

    ②第二種的營養鹽是氮源,氮源是硝酸鹽、氨鹽和尿素,藻類的生長離不開氮元素,一般大多數單胞藻干物中含有7-9%的氮源。

    ③第三種營養元素是礦物質,藻類對礦物質的利用與植物一樣,但對鈣的吸收比較少,主要的成分是鉀、鎂、鈉、鈣、硫酸鹽和磷酸鹽。

    ④在培養藻類的時候我們通常把pH值調到稍微偏酸,避免鈣鎂和其它微量元素發生沉淀。

    ⑤也需要添加一定量的微量元素。

    ⑥最后還要添加一定量的維生素,通常有維生素B1和B12,但是維生素的量非常少,如果添加量大也繁殖不起來。


    我們在培養藻類的時候,添加營養基的時候要根據藻類的數量和種類選擇不同的營養基,而且營養基的量也不一樣,如果量大了,它也可能抑制藻類的生長,量少了也可能供不上藻類的生長。這里面都有一定的比例和要求。

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    培養方法

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    首先要選擇合適的培養容器,二級培養通常選擇小型的培養容器,三角錐瓶或者5L或者10L的桶,大規模培養要選擇大的容器,選好容器后我們要對容器進行消毒。


    消毒的方法有物理方法和化學方法


    物理方法是通過加熱消毒,加熱消毒可以直接用酒精燈之類去燒所用的容器,還可以煮沸消毒。
    化學方法,工廠中一般大容器采用化學方法消毒。常用的化學藥品有漂白粉、酒精和高錳酸鉀。


    培養液的配制:
    我們自己培養通常配比不好,一般選擇合適的培養基,不同的藻種,然后去定制生產。
    藻種有了,培養基我們也配制好了,有現成的培養基,那么下面我們可以做二級培養了。


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    發表于 2016-11-3 15:41:55 |顯示全部樓層
    接種

    1、接種質量:一般要求選取無敵害生物污染,生活力強,生活旺盛的藻種培養。

    2、藻種數量:
    藻種培養:藻液容量和新配培養液比例為1:2,二級培養是1:3,也就是一瓶的藻種可以接3-4瓶的藻量。
    二級培養和三級培養由于培養容器容量大,藻種供應有時不足,可根據具體情況靈活掌握,但最少不宜低于1:50。一般以1:10-1:20較適宜。如果藻量特別少,繁殖速度就很慢。

    3、接種時間:接種的時候要選擇上午的時間,最好在8-10點,不適合在晚上接種,晚上接種的話成功比較低。
    藻種拿到以后,首先要拿出來讓它復蘇幾個小時,這樣接種效果相對好,接種量控制二級培養在一瓶接3-4瓶。

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    培養管理:

    我們做好了接種,那么就要對所做的培養進行管理。

    ①要不斷的攪拌和充氣,通過攪拌或充氣增加水和空氣的接觸面,使空氣中二氧化碳溶解到培養液中,補充由于藻細胞作用對二氧化碳的消耗。幫助沉淀藻細胞上浮而獲得光照。
    防止水表面長出菌膜,攪動、搖動一般每天至少3次,定時進行,每次半分鐘,充氣可24小時連續充氣或間歇充氣。

    ②燈光的調節:極端易變是太陽光源的特點,必須根據天氣情況,不斷調節光照度。室內盡可能利用近窗口的漫射光,防止直射光照射,光照過強時可用布簾遮光調節。室外一般應有棚室頂架,用活動白帆布或彩條布蓬調節光照,陰雨天,可短期利用人工光照。光線太強對藻類生長不利,光線太弱對藻類生長也不利,要適合的光照,小球藻的適合光照在5000-8000lux,這是我們通過實驗室試驗總結出來的。

    ③溫度的管理:小球藻培養溫度我們最高在36度(在海南),我們也做得非常好,生長速度很快,溫度越高生長速度越快,在溫度比較低的時候生長速度就比較慢,通常小球藻的培養生長周期快的時候4天,慢的時候應該在10天左右。

    ④注意酸堿度的變化和二氧化碳的進入量,pH值太高對藻類生長也不利,pH值太低也不行,1mol/L的鹽酸或氫氧化鈉調節pH值。

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