[病例209]河北唐山唐?h十農場一南美白對蝦池塘,面積10畝,水深1.3米,配備2臺增氧機。2012年5月15日放養蝦苗100萬尾,5月31日放養蝦苗30萬尾。沒套養魚類。
6月2日蝦開始有游塘、死亡,之后逐漸增多,到6月13日每天游塘、死亡的蝦達到幾百尾,高峰時一天最多死亡1000尾。每天都是下午大量游塘,特別下午3、4點鐘特別多,早晨很少見到游塘蝦。
6月13日上午10點到現場觀察池塘水色黃綠色,透明度約40 cm。鏡檢藻類以小型綠藻為主,用簡易測試盒檢測水質,pH值9.1(平時測定多在8.6~8.7),溶解氧5 mg/L,氨氮、亞硝酸測不出(見圖2)。發病游塘蝦普遍體色發紅,紅尾紅須,紅肝紅腸,空腸或腸道不飽滿,有的肝臟外觀模糊,有的尾部肌肉發白。
取游塘活蝦6尾(見圖3~4),現場接種肝臟做細菌分離培養和取肌肉病料帶回公司研究所用PCR方法做病毒檢測。結果有2尾病蝦分離到了細菌(見圖5)。病毒檢測結果,6尾病蝦白斑綜合癥病毒都呈陽性,1尾皮下及造血器官壞死病毒呈陽性,桃拉病毒都呈陰性(圖6)。
分析:發病蝦身體發紅,取樣的6尾游塘蝦病毒檢測都有白斑綜合癥病毒,游塘、死亡應該是白斑綜合癥病毒引起。游塘時間主要發生在下午陽光最強烈的時間,生物、水化指標也具有氣泡病的發生條件,游塘蝦有的也有尾部肌肉發白的氣泡病癥狀,可見氣泡病加重了白斑綜合癥的游塘和死亡。(利洋公司技術部 唐紹林 利洋水產藥店十場店 于景艷提供 2012.08.02)
來源:利洋服務
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tangsl:圖5為從南美白對蝦肝胰臟中接種少量組織,在營養瓊脂培養皿上劃線,常溫下細菌培養,從細菌的分離結果來看,第1只蝦和第5只蝦肝胰臟中細菌較多。
圖6為南美白對蝦白斑癥病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)和傳染性皮下與造血器官壞死病毒(IHHNV)PCR(聚合酶鏈式反應)擴增后,電泳結果圖。根據建立PCR檢查方法時引物設計,白斑癥病毒的預擴增片段長為296bp,桃拉病毒的預擴增片段長為231bp,傳染性皮下與造血器官壞死病毒的預擴增片段長為350bp。圖6中,第1個點樣孔為DL2000 DNA Marker(DNA分子質量標準),從上往下的片段長依次為100bp,250bp,500bp,750bp,1000bp,2000bp。
第2至第7孔為6只蝦白斑癥病毒PCR檢測結果,從圖中可以看出,6只蝦樣品中均擴增出比250bp稍大一些的片段,與預期擴增片段(296bp)相符,因此,6只蝦均感染白斑癥病毒。
第8至第13孔為6只蝦傳染性皮下與造血器官壞死病毒PCR檢測結果,從圖中可以看出,6只蝦樣品中第6只擴增出在250bp和500bp中間的片段,與預期擴增片段(350bp)相符,因此,第6只蝦感染傳染性皮下與造血器官壞死病毒。
第14至第19孔為6只蝦桃拉病毒PCR檢測結果,從圖中可以看出,無片段擴增出,6只蝦無桃拉病毒感染。
(注:bp是指堿基對,堿基對是一對相互匹配的堿基,即A:T, G:C,A:U相互作用,被氫鍵連接起來,是形成DNA、RNA單體以及編碼遺傳信息的化學結構)
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