水產前沿網 | 網聚全球水產華人

標題: 水產噬弧菌之實踐意義 [打印本頁]

作者: 我愛養蝦 時間: 2012-2-2 12:33
標題: 水產噬弧菌之實踐意義
雖然噬弧菌在養蝦中的應用已不是什么新鮮事，但是我們還是有必要就噬弧菌的現實意義進行交流探討一起共同進步。一.噬弧菌使用時機。二.噬弧菌可否替代殺菌劑。三.噬弧菌與其他有益菌的配合使用.。四.使用頻率四。歡迎蝦米們踴躍發言！

作者: 511 時間: 2012-2-2 13:06
噬弧菌？概念來的吧

作者: 水寶寶 時間: 2012-2-2 15:20
噬菌弧菌──細菌的寄生菌

一般認為海水具有殺菌作用，原因在于其所含的高鹽份，也有人說某些海藻可產生殺菌物質。但是，將海水加熱滅菌或過濾后其殺菌效果遂降低，于是，有些微生物學者推測其中也有微生物參與作用。1967年美國麻省理工學院應用微生物研究室發表研究報告指出，由海水份離的兩種微生物對于大腸桿菌（Escherichia coli）有致死效果。其中一種與大腸桿菌同時培養在洋菜平板上，會產生溶菌斑（plaque）。在顯微鏡下觀察，這種微生物為形體比一般細菌小、運動迅速的弧菌（Vibrio）。1975年，日本大阪市立環境科學研究院也發現在海水中有相似的微生物，對于常引起夏天集體中毒事件的腸炎弧菌（Vibrio parahaemolyticus）有顯著的致死效果。經鑒定，這兩種對大腸桿菌、腸炎弧菌有致死效果的微生物均為特殊的寄生性細菌。這種細菌1962年才被發現，并命名為噬菌弧菌（Bdellovibrio bacteriovorus）。目前我們已知海水中普遍存在著這種噬菌弧菌，隨季節的變化與腸炎弧菌族群有相似的消長關系。蘇俄也在1976年左右發表多篇有關噬菌弧菌在河川、污水凈化作用上所扮演角色的文章。

可能因發現較遲而且不是病原菌，一般微生物學書籍中對噬菌弧菌的敘述大多很簡短，甚至全無。國內也僅少數專家曾注意到，但其獨特的生活方式在細菌界中是僅有的，在生命界中又是一奧秘所在。故本文對其作一般性介紹。

噬菌弧菌的發現及特征

噬菌弧菌為德國微生物學家史托普（H. Stolp）于1962年發現。由于此項發現，她在1968年榮獲為紀念近代微生物學先驅──羅勃科霍（Robert Koch, 1843～1910）設立的「羅勃科霍獎」。

一般的細菌大小都在0.5μm以上，故研究上常以孔徑0.45μm的過濾膜濾除細菌。研究噬菌體（bacteriophage）時通常也是用這種過濾法將噬菌體和細菌份開。當史托普的研究小組進行由土壤篩選菜豆暈環葉燒病菌（Pseudomonas phaseolicola）的噬菌體時，將土壤懸浮液以孔徑0.45um的過濾膜過濾，然后與菜豆暈環葉燒病菌混合在洋菜平板上培養。噬菌體的溶菌斑通常在24小時內可生成。很偶然地，她們在一批已棄置的培養皿上發現一些特殊的溶菌斑，要三、四天才出現而且一周內會繼續擴大。就已有的了解：噬菌體本身缺乏完整的代謝機能，必須感染寄主隨寄主菌的份裂一起復制DNA，才能繁殖。所以通常溶菌斑只在寄主菌繁殖的階段形成，而且形成后不會擴大。因此她們推測這些后生成的溶菌斑可能不是由噬菌體形成。由一連串的實驗結果證實，這些特殊的溶菌斑確是由另一種微生物所形成；是一種形體較一般細菌小、未曾見諸文獻的寄生性細菌。就當時所觀察到的寄生現象，史托普將之命名為Bdellovibrio bacteriovorus，屬名字頭來自希臘文Bdella，相當英文leech、sucker，是水蛭、吸吮者之意，說它像水蛭一般吸附于寄主細胞表層吸食養份。（現已證實原觀察錯誤，實為穿過寄主菌體的細胞表層寄生于細胞壁與細胞膜間。）vibrio指其形狀為弧菌，bacteriovorus表示其為食細菌者。因為它與噬菌體相似，在寄主菌體內繁殖導致寄主菌死亡，然后釋出長成的子細胞再感染其她菌體，以洋菜平板培養時形成溶菌斑，故本文稱之為噬菌弧菌。

噬菌弧菌有三類型菌株：寄生性株、腐生性株及兼性生長株（見圖一）。寄生性株可對寄主行掠奪式（predatory）寄生，形成溶菌斑（見圖二）。以一般份離噬菌體的方法可從自然界得到。在寄生性株中會出現失去寄生能力的腐生性株，機率為10-6~10-9。腐生性株可以用含蛋白質的完全培養基培養。兼性生長株與寄主一起作洋菜平板培養時以溶菌圈出現，如圖二中箭頭所指。在顯微鏡下觀察時透明圈處大多為寄生后溶解寄主菌所長成的弧菌，中央菌落則為腐生生長長成的桿狀或螺旋狀菌體，如圖一右側所繪。

史托普指出，噬菌弧菌的特征為：弧狀菌，寬0.3～0.45μm，長0.8～1.2μm，具備包有鞘膜的單極鞭毛，革蘭氏染色時為陰性反應，會侵入她種細菌體營寄生生長。生活周期中另有無鞭毛的螺旋狀營養體時期。生長時需要氧氣，只能利用有機碳源，尤其是蛋白質�？山浫人嵫h（TCA cycle）代謝，但通常不能代謝醣類。

由于性狀特殊，份類上Bergey's Manual of Determinative Bacteriology第八版中將噬菌弧菌歸于未定屬的部份。

寄主范圍及與寄主的關系

通常噬菌弧菌的寄生不具嚴格菌株專一性，不像噬菌體只感染某一特定菌株。但有其寄主范圍，各菌株的寄主范圍可能有差異�，F已發現可被寄生的僅限于革蘭氏陰性細菌：包括產氣桿菌屬（Aerobacter）、伊文氏桿菌屬（Erwinia）、鋸桿菌屬（Serratia）、沙門桿菌屬（Salmonella）、假單胞菌屬（Pseudomonas）、黃色單胞菌屬（Xanthomonas）、定氮菌屬（Azotobacter）、根瘤菌屬（Rhizobium）、原野菌屬（Agrobacterium）、志賀桿菌屬（Shigella）、螺旋菌屬（Spirillum）、紫螺旋菌屬（Rhodospirillum）、大腸桿菌屬（Escherichia）、檸檬桿菌屬（Citrobacter）、腸桿菌屬（Enterobacter）、弧菌屬（Vibrio）、莫拉克斯菌屬（Moraxella）、發光菌屬（Photobacterium）、變形桿菌屬（Proteus）中的各菌種。對于革蘭氏陽性細菌、霉菌、酵母菌及動植物細胞尚未發現可寄生者。

噬菌弧菌與寄主間的關系可份為：寄主的辨識、吸附并鉆入、寄生繁殖及釋出長成的弧菌等階段。各階段進行的機制并未完全清楚。

許多種細菌混合在一起培養時，噬菌弧菌會從中選擇其寄主進行寄生。它先吸附至寄主表面，再藉菌體本身機械性「鉆」的力量及的水解在寄主菌體表層形成小孔并穿過。寄生于細胞壁與細胞膜之間，隔著細胞膜份解利用寄主的細胞內容物。它先由弧菌增長成桿狀或螺旋狀菌體，再份裂成小型弧菌（請見圖一左側寄生性株的生長）。隨著它的生長，寄主菌體內容物逐漸被份解而萎縮，終至僅余空殼。在相差顯微鏡（phase contrast microscope）下可見空殼內部迅速運動的噬菌弧菌。最后有作用于殘余的細胞表層、釋出弧菌。圖三為相差顯微鏡下大腸桿菌被噬菌弧菌寄生后的變化情形：正常的大腸桿菌菌體如（a）；被寄生后內部的噬菌弧菌生長使菌體膨大如（b）；寄生的噬菌弧菌份裂成小弧菌如（c）所見大型菌體內的小黑點；弧菌長成后釋出于菌體四周，大腸桿菌僅存空殼如（d）。

由于它像噬菌體一般，在寄主菌體內繁殖導致寄主死亡，故稱之為噬菌弧菌。但根本上，噬菌體利用寄主的代謝機能以繁殖，噬菌弧菌單純地以寄主菌體的成份為食物，是截然不同的。

結語

噬菌弧菌廣泛地份布于自然界，由土壤、水田、灌溉渠、陰溝、河川、湖泊、海水中均曾份離到。目前對其自然生態、形態及與寄主間的作用形式已有較多的認識。生理機能、生化性質方面所知有限。就學術上而言，是很好的研究題才。應用方面，有許多文獻提出用它來進行生物性控制的研究（即以菌制菌）。例如有人將噬菌弧菌注射至感染志賀氏桿菌（Shigella flexneri）的兔子眼睛中，結果抑制了角膜結膜炎的發生。也有許多人正在研究如何用它來對抗流水中的大腸菌類、腸內有害微生物、養殖業、農業上的病原菌等。更進一步來說，造成它特殊生活方式的生理控制或系統，說不定還有更高的利用價值！

水產前沿網

圖一：噬菌弧菌的生活週期。

水產前沿網

國二：噬菌弧菌形成的溶菌斑，箭頭所指為兼性生長株形成的溶菌圈。

水產前沿網

圖三：噬菌弧菌寄生後的大腸桿菌。（a）為正常的大腸稈菌菌體。被寄生後變化成如（b）再至（c）而（d）之形狀。

作者: 子皓 時間: 2012-2-2 19:02
回復 3# 水寶寶

這是在實驗室做的試驗吧？在蝦塘復雜環境里的效果沒有這么好吧？

作者: 我愛養蝦 時間: 2012-2-2 20:57
有需要噬弧菌資料的快來吧！

噬菌蛭弧菌微生態制劑產品專題解.pdf

412.43 KB, 下載次數: 84

水產用蛭弧菌微生物生態制劑——噬8使用注意事項.pdf

40.4 KB, 下載次數: 79

蛭弧菌在對蝦養殖中應用的探討.pdf

56.14 KB, 下載次數: 84

作者: 我愛養蝦 時間: 2012-2-2 21:38
還有呢！一起分享

abbr_88835f0ca920f3e05e8a61e0ac74c508.pdf

177.87 KB, 下載次數: 57

abbr_c680896e1d61c85e95a089ccdf89274c.pdf

215.46 KB, 下載次數: 68

蛭弧菌、乳酸菌、蠟樣芽孢桿TWYB1.pdf

231.45 KB, 下載次數: 83

作者: 阿水 時間: 2012-2-3 09:28
發揮更高的利用價值！

作者: mlhuanyao 時間: 2012-2-3 13:52
在低位池效果好，在高位池后期基本沒效果，后期大量大量使用會引起倒藻！

作者: 庸魚自擾 時間: 2012-2-3 23:14
本帖最后由水寶寶于 2012-2-18 15:06 編輯

水產論壇也有討論：

大致如下：
.1 蛭弧菌投入到水體，它所攻擊的幾乎是一切異養菌;
.2 蛭弧菌不僅能裂解大腸桿菌、沙門氏菌、副溶血弧菌等常見的細菌，還能寄生于變形桿菌屬、假單胞菌屬及氣單胞菌屬等一些病原菌，并且對病原菌的裂解能力明顯高于其他一些普通細菌。如果必須要排個先后順序的話，大概是：大腸桿菌、沙門氏菌、副溶血弧菌、嗜水氣單胞菌、假單胞菌等。而且以上病原菌少的時候還能裂解部分單細胞藻.
.3 蛭弧菌對于病原菌、生態菌的裂解速率相同。
.4 蛭弧菌在天然水體中也有它自己的致命殺手：蛭弧菌噬菌體，該噬菌體裂解蛭弧菌，維持水體菌相平衡。

作者: 水之旅程 時間: 2012-2-4 23:06
呵呵實驗室里應該試驗過了實踐操作中靜待效果

作者: 沙角養蝦 時間: 2012-2-17 12:25
請高人說說使用噬弧菌能否代替消毒劑啊

作者: hdg979 時間: 2012-5-4 10:22
蛭弧菌因生長周期長，效果不是很明顯

歡迎光臨水產前沿網 | 網聚全球水產華人 (http://m.szsfz.cn/)